新的顯微鏡方法可能會導致細胞生物學的進步
UT Southwestern 的研究人員發(fā)明了一種新的顯微鏡方法,可以開辟先進顯微鏡的新途徑。
美國德克薩斯大學 (UT) 西南分校的一組科學家與英國和澳大利亞的同事合作,構建并測試了一種新的光學設備,該設備將常用顯微鏡轉(zhuǎn)換為多角度投影成像系統(tǒng),為先進顯微鏡開辟了新途徑.
目前,獲取三維 (3D) 圖像信息需要一個數(shù)據(jù)密集型過程,其中將數(shù)百個樣本的二維 (2D) 圖像組合成一個“圖像堆?!?。為了可視化數(shù)據(jù),然后將圖像堆棧加載到圖形軟件程序中,該程序執(zhí)行計算以在計算機屏幕上從不同的觀察角度形成 2D 投影?!斑@兩個步驟需要大量時間,并且可能需要非常強大且昂貴的計算機來與數(shù)據(jù)交互,”通訊作者 Reto Fiolka 解釋說。
該團隊意識到,該程序可以通過光學方式形成多個角度的投影,使用一個簡單且經(jīng)濟高效的單元,該單元由兩個旋轉(zhuǎn)鏡組成,兩個旋轉(zhuǎn)鏡插入顯微鏡系統(tǒng)的攝像頭前。因此,該系統(tǒng)無需獲取圖像堆棧并使用計算機進行渲染。雖然整個 3D 圖像堆??赡苄枰獢?shù)百個攝像頭幀,但這種新方法只需要一個攝像頭曝光,因此有望實現(xiàn)難以置信的快速成像。
“因此,我們可以實時完成所有這些工作,沒有任何明顯的延遲……我們相信這項發(fā)明可能代表了通過熒光顯微鏡獲取 3D 信息的新范例,”Fiolka 說。
研究人員最初用兩個普通的光片顯微鏡開發(fā)了顯微鏡系統(tǒng),需要一個后處理步驟來理解數(shù)據(jù),這被稱為去偏斜;這實質(zhì)上意味著重新排列單個圖像以消除 3D 圖像堆棧中的一些失真。該團隊旨在以光學方式執(zhí)行這種去偏斜,但意識到當他們使用不正確的量時,投影圖像似乎會旋轉(zhuǎn)。
“我們意識到這可能不僅僅是一種光學校正方法;該系統(tǒng)也適用于其他類型的顯微鏡,”Fiolka 補充道。
“這項研究證實了這個概念更普遍,”共同作者凱文迪恩總結道?!拔覀儸F(xiàn)在已將其應用于各種顯微鏡,包括光片和旋轉(zhuǎn)圓盤共聚焦顯微鏡?!?/p>
該團隊使用新的顯微鏡方法對培養(yǎng)皿中神經(jīng)細胞之間攜帶信號的鈣離子進行成像,并觀察了斑馬魚胚胎的脈管系統(tǒng)。他們還對運動中的癌細胞和跳動的斑馬魚心臟進行了快速成像。
本發(fā)明在Nature Methods 中有所描述。
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