光學顯微鏡的發(fā)展歷史——十七世紀的顯微科學
光學顯微鏡的發(fā)展歷史系列:
十七世紀的單式顯微鏡與其說是科學儀器,不如說是藝術品。似乎那時的顯微鏡制造者所追求的并不是高的性能,而是視覺上的享受,比如下面的這個顯微鏡。它制造于十七世紀晚期,很明顯,它的作用已不再是單純的放大物體以方便研究,更重要的是它那光亮美麗的黃銅色,精美的裝飾還給人以一種高貴典雅的美感。
結(jié)構:這個單式顯微鏡的鏡頭鑲在一個圓盤形金屬眼罩的中部,兩個金屬手柄一長一短,長的那個手柄是手握的地方,在其末端還設置了幾個突起,方便使用者握住。在這兩個手柄的中間,夾著一個有六個圓孔可以轉(zhuǎn)動的圓盤,那是它的載物臺。
使用:在使用前,把樣品切成薄片放到載物臺的圓孔上,然后拿起顯微鏡將圓孔對準光源,同時把金屬眼罩放在眼窩上以擋住周圍的光,用大拇指按壓較短的那個手柄(那相當于一個杠桿),以此調(diào)節(jié)鏡頭與標本的距離,使成像最為清晰。如果切片較多,可以依次放到每個圓孔上,在觀察時轉(zhuǎn)動載物臺即可觀察到每個切片。從這個顯微鏡鏡頭的大小來看,它的放大率應該比較大。??
在十七世紀中葉,出現(xiàn)了一種滑桿顯微鏡。
它們的基本結(jié)構大致相同:燈塔形的鏡身,頂端是一個凸透鏡,在鏡身中部穿過一根長長的可以水平滑動的橫桿,在橫桿前端固定著一根頂端削尖,與橫桿垂直的長“針”——奇特的載物臺。
使用時,先將針尖刺入標本,使標本固定在針尖上;然后前后移動滑桿,調(diào)節(jié)標本與透鏡的距離,使成像最清晰后,即可進行觀察。從這個顯微鏡的透鏡大小可以看出,該顯微鏡的放大率不大。??
缺點:標本放在針形的載物臺上實在不穩(wěn)定,觀察時的實際操作很麻煩。因此,后來的顯微鏡就沒有采用這種針形載物臺。??
列文虎克[Antony Van Leeuwenhoek](1632-1723),荷蘭代爾夫特人,是生物學發(fā)展史上的一位重要人物,一位僅僅受過初級教育的天才科學家和顯微鏡制造者。他手工制造的單顯微鏡質(zhì)量如此之高,以至于現(xiàn)在都無人能夠僅憑雙手制造出比它們更好的單顯微鏡。他最先發(fā)現(xiàn)了細菌,從而開創(chuàng)了微生物學;他正確地描述了微生物的形態(tài)有球形,桿狀和螺旋樣等;他證實了毛細血管的真實存在,結(jié)束了有關血液循環(huán)的爭論;他首次描述了昆蟲,狗和人的精子;他還指出:在所有露天積水中都可以找到微生物,這是人類認識微生物的分布的一次進步;他又通過事實證明了當時流行的生物自然發(fā)生論的錯誤,改變了人們的觀念。1673年,他與英國皇家學會建立了聯(lián)系,一直持續(xù)到他1723年逝世的前一刻。
列文虎克在1677年用自制的高倍放大鏡觀察池塘水中的原生動物,蛙腸內(nèi)的原生動物,人類和哺乳類動物的精子;后又在鮭魚的血液中看到紅細胞的核;1683年,他又在牙垢中看到了細菌。他把觀察的現(xiàn)象報告給英國皇家學會,得到英國皇家學會的肯定。
列文虎克出身于布商,他最初磨制透鏡的目的是為了檢驗布的質(zhì)量,但他在掌握了高水平的磨制透鏡技術后,進而利用透鏡組裝成顯微鏡,并利用自制的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了前人未曾見到過的一些活細胞,這些成就是十分難能可貴的。他一生親自磨制了550個透鏡,裝配了247架顯微鏡,為人類創(chuàng)造了一批寶貴的財富,至今保留下來的有9架,現(xiàn)存于荷蘭尤特萊克特大學博物館中的一架的放大倍數(shù)為270倍,分辨率為1.4微米。在當時,這個水平是很高的,直到19世紀初所制的顯微鏡還未超過這一水平。因此,我們不能忽視他對細胞生物學的發(fā)展所做貢獻的重要性。?列文虎克一生制造了數(shù)百個顯微鏡,它們都非常小,設計和功能也相似,他的顯微鏡的尺寸幾乎是一個常數(shù):長2英寸,寬1英寸,鏡身大多是用黃銅制造。
結(jié)構:一個典型列文虎克顯微鏡是由兩個螺釘(其中較長的一個是手柄,其長度可以調(diào)節(jié),通過調(diào)節(jié)較短的那個螺釘可以改變標本與透鏡的距離),幾個鉚釘,一個鏡頭,一個寬大的鏡身,一個針形載物臺(連接在手柄上,通過調(diào)節(jié)手柄長度可以調(diào)節(jié)標本的高度)。鏡身的結(jié)構較為精巧:首先在兩塊同樣形狀的黃銅薄板上對稱地鑿兩個孔;然后把鏡頭放在其中一個孔上,再把另一塊黃銅板放在上面,對齊這兩塊黃銅板,使這兩個孔剛好把中間的透鏡鑲?。蛔詈笥勉T釘固定住銅板即可。??
使用:同樣先將標本固定在針尖上,然后拿起顯微鏡對著光源,同時調(diào)節(jié)那兩個螺釘使標本的位置,影像最佳后即可進行觀察。
十七世紀復式顯微鏡的初步發(fā)展?
在十六世紀晚期,第一個復式顯微鏡由荷蘭人詹森(Janssen)發(fā)明,此后復式顯微鏡開始被人們使用。但是,一直到十七世紀末,復式顯微鏡都使用得沒有單式顯微鏡廣泛。因為當時的復式顯微鏡有一個極大的缺點:由于當時的透鏡制造技術不高,因此制造出的復式顯微鏡的像差和色差都很大,這使人們大都不喜歡使用復式顯微鏡。盡管如此,還是有些人制造、使用了一些復式顯微鏡。比如意大利人伽利略(Galileo)和英國人胡克(Hooke)。
伽利略的顯微鏡
伽利略的顯微鏡(制造于17世紀晚期)繼承了詹森顯微鏡的特點,同樣是兩個可以伸縮的套筒,通過改變套筒的長度來調(diào)焦。但伽利略作了一點改進,在套筒外壁上刻上了很多螺紋,通過旋轉(zhuǎn)套筒即可使套筒上下伸縮,完成調(diào)焦,這樣顯微鏡使用起來就較為平穩(wěn)。這個顯微鏡制作十分精美:黃銅制作的鏡身,四個支架被精心雕刻成彎曲狀,這充分表現(xiàn)了當時人們的審美觀。
但伽利略顯微鏡有一個缺點,由于那四個支架不能移動,因而該顯微鏡只能豎直放在桌面上,這樣,它的光源只能是來自物體表面的反射光,而不能采用透 射光(現(xiàn)在大多數(shù)顯微鏡都是這樣采光)觀察,因此,用這個顯微鏡所能觀察的樣本很少,滿足不了研究的需要。
胡克的顯微鏡
胡克花了很大的工夫去完善他那個美麗的顯微鏡。這個顯微鏡由兩個部分組成:一個光源系統(tǒng)(圖中右邊的那個物體),一個顯微系統(tǒng)(圖中左邊的物體)。
光源系統(tǒng):光源系統(tǒng)的設計在當時是一個創(chuàng)造。它由一個木制支架,一個油燈(Oil Lamp),一個盛水的大玻璃球,一個小的光闌組成。光由油燈產(chǎn)生,通過玻璃球會聚,由光闌調(diào)節(jié)光通量。
顯微系統(tǒng):顯微系統(tǒng)的設計在當時也是較為復雜、先進的。它由載物臺(Specimen Holder)、物鏡(Objective)、調(diào)焦螺旋(Focusing Screw)、鏡筒(Barrel),目鏡(Eyepiece)組成。
物鏡:物鏡頂端是一個雙凸透鏡,后面是幾個輔助透鏡。它們共同構成了一個復合物鏡,這在當時是極為先進的。?
調(diào)焦螺旋:這個設計與伽利略顯微鏡一樣,通過旋轉(zhuǎn)鏡筒而使鏡筒上雕刻的螺紋在顯微鏡支架上的螺旋套中發(fā)生轉(zhuǎn)動,從而使鏡筒上下運動,這跟旋轉(zhuǎn)螺釘而使其在螺母的孔中上下運動相同。?
鏡筒:鏡筒的設計與當時鏡筒的普遍設計相比沒有多大不同,仍然是一個刻著花紋的木質(zhì)鏡筒。
目鏡:目鏡的頂端是一個凸透鏡。但在目鏡鏡筒內(nèi)還有幾個小透鏡,它們叫做“場鏡”,作用是輔助目鏡成像。這種復合目鏡在當時也是一種很先進的設計。
這個顯微鏡最初完工的時候,存在著很大的球面像差和色差,這使得成像的質(zhì)量很糟。胡克為此而在光源系統(tǒng)上安裝了那個光闌。很不幸,改造后的顯微鏡成的像十分暗淡,還有光的衍射現(xiàn)象,成像的質(zhì)量還是很差。但是,就是用這個顯微鏡,人類第一次看見了典型的細胞(人類實際上很早就見過細胞了——蛋——極大的細胞,每個人都見過。但是真正意義上的典型細胞非要顯微鏡才能看到,下文所說的細胞將只是指典型細胞)。
1665年,胡克應用自己研制的那個簡陋顯微鏡觀察軟木塞薄片時,發(fā)現(xiàn)了許多蜂窩狀小室,稱為Cell(小室之意,由拉丁文cellulae演變而來)。盡管這些細胞早已死去,只留下細胞壁,但這是細胞第一次被人類發(fā)現(xiàn)。
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